Adar是什么意思r在线翻译读音例句

ADAR2通过编辑MAVS基因的3\'UTR降低其在细胞中的表

达

李涛;李京源;朱席琳;伍晓盼;刘英

【摘要】目的探讨ADAR2在细胞中对线粒体抗病毒信号蛋白MAVS表达的影响

及其机制.方法用RT-qRCR检测ADAR家族在细胞中的表达、ADAR2质粒过表达

效果以及MAVS的表达;焦磷酸测序验证ADAR2对MAVS的3\'UTR区域位点的

编辑;双荧光素酶报告质粒检测荧光素酶的相对表达;Westernblot检测ADAR2和

MAVS蛋白的表达.结果ADAR家族中ADAR1丰度最高,其次ADAR2也有表达,

而ADAR3的表达量很低,几垒组词 乎检测不到(P<0.05);ADAR2对MAVS的3\'UTR区域

上的chr20:3869744位点发挥RNA编辑作用(P<0.001);MAVS的3\'UTR编辑位

点上,编辑型G比正常型A的荧光素酶活性显著降低(P<0.01);在转录和翻译水

平,ADAR2都显著降低了MAVS的表达(P<0.05).结论ADAR2通过编辑MAVS的

3\'UTR上的chr20:3869744位点,使其发生A→G的替换,进而抑制了MAVS基因

的表达.%ObjectiveToinvestigatetheeffectofADAR2ontheexpressionof

sTheRT-qRCRwasusedtodetectthe

expressionofADARgenefamily,theexpressionlevelofADAR2andMAVS

ectofADAR2onthe3\'UTRregionofMAVSwasdetectedby

cttheexpressionofluciferasebydualluciferase惠组词是

reporterplasmidassay;TheexpressionofADAR2andMAVSweredetected

sIntheADARfamily,theabundanceofADAR1was

thehighest,followedbyADAR2,buttheexpressionofADAR3waspoor,

whichwasalmostimpossibletodetect(P<0.05).ADAR2playedacritical

roleinRNAeditingofchr20:3869744sitesonthe3\'UTRregionof

MAVS(P<0.001).Onthe3\'UTReditingsiteofMAVS,theluciferaseactivity

oftheeditedGallelewassignificantlylowerthanthatofthenormalA

allele(P<0.01).Attheleveloftranscriptionandtranslation,ADAR2

significantlyinhibitedtheexpressionofMAVS(P<0.05).ConclusionsADAR2

byeditingMAVS`3\'UTRonthechr20:3869744site,whichmakesthe

occurrenceofAtoGreplac唐伯虎诗词经典名句 ement,inhibitstheexpressionofMAVS.

【期刊名称】《基础医学与临床》

【年(卷),期】2017(037)006

【总页数】5页(P747-751)

【关键词】作用于RNA的腺苷脱氨酶2;线粒体抗病毒信号蛋白;RNA编辑

【作者】李涛;李京源;朱席琳;伍晓盼;刘英

【作者单位】中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,

北京100005;中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,

北京100005;中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,

北京100005;中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,

北京100005;中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,乌衣巷刘禹锡视频

北京100005

【正文语种】中文

【中图分类】Q752

特异性作用于RNA的人类腺苷脱氨酶(AdenosinedeaminaseactingonRNA)

基因家族包括ADAR1、ADAR2和ADAR3三种基因[1]。ADAR基因家族的主要

生物学功能为RNA编辑，即催化其RNA底物由腺苷(A)变为肌苷(I)，而肌苷(I)能

被核糖体及RNA聚合酶识别为鸟苷(G)。因此，在转录时能导致RNA碱基A→G

的替换[2-3]。这可能会改变密码子，从而对基因的翻译表达及功能产生深远影响。

而ADAR3不具有RNA编辑酶活性。但有报道说，其可能对ADAR1和ADAR2

有抑制作用[4-5]。

本课题组前期研究发现，线粒体抗病毒信号蛋白基因MAVS的3′UTR区域存七八个星天外两三点雨山前的意思 在两

个非SNP的编辑位点，其中一个位点证实可被ADAR1编辑；而另一个位点存在

编辑现象，但不受ADAR1作用。猜测，ADAR家族其他基因可能会对其发挥编辑

作用，故进一步探究其中的机制。

1.1试剂

1.2方法

检测所用细胞系为转染效率较高的HepG2和HeLa细胞系。转染时对于24孔板，

每孔中3′UTR和ADAR2共转染比例为pmiR-MAVS-3′UTR(300ng):ADAR2

过表达质粒(300ng)，lipofectamine3000使用量为1L/孔。然后按双荧光素

酶报告基因检测试剂盒说明书要求操作。在PromegaGloMax96微孔板发光检

测仪上读值，最后计算荧光素酶相对活性=海肾荧光素酶活性/萤火虫荧光素酶活

性。

1.3统计学分析

实验方孝孺被灭十族 数据的分析和作图采用Graphpad5.0软件。数据以均数标准差表示。所有

实验结果都至少进行3次随机独立实验。采用t检验对数据进行统计学分析。

2.1ADAR家族在HepG2细胞中的表达水平

在ADAR家族中ADAR1的表达丰度最高，比ADAR2的表达量高10多倍，而

ADAR3的表达最低，几乎检测不到(P<0.05)(图1)。

MAVS的3′UTR区域上的chr20:3869744位点是受ADAR2的编辑改变，片片吹落轩辕台全诗 相较于

对照组，过表达ADAR2可显著提高此位点的G等位基因比例(P<0.001)，即存在

正相关性(图2)。

编辑型G等位基因比正常型A等位基因的荧光素酶活性显著降低，在HepG2细

胞降低比例为37.4%(6.721.05比10.731.14,n=5)(P<0.001)，在Hela细胞中

降低比例为28.2%(4.660.49比6.490.92,n=5)(P<0.01)；进一步将ADAR2过

表达质粒与报告基因质粒共表达后，ADAR2+3′UTR-A组的荧光素酶活性(在

HepG2细胞中8.480.86,n=5，在Hela细胞中5.360.35,n=5)较只表达报告基

因3′UTR-A组降低(P<0.05)，而编辑型3′UTR-G组无显著性差异(图3)。

2.4ADAR2在mRNA和蛋白水平均能有效抑制MAVS的表达

在mRNA水平，ADAR2质粒有效过表达,并且MAVS过表达组的mRNA表达水

平(0.550.10,n=3)相较于FLAG对照组显著降低了44.8%(P<0.05)(图4A)。在蛋

白水平进一步验证，发现实验组ADAR2蛋白表达升高后,MAVS的蛋白表达

(0.400.08,n=3)较FLAG对照组(0.710.11,n=3)降低了43.1%，差异显著

(P<0.05)(图4B)。

本研究中ADAR2主要通过发挥其RNA编辑的功能对下游基因MAVS的3′UTR

上的位点产生A→G的编辑作用，从而影响了MAVS的表达水平。而3′UTR的改

变如何具体的影响其基因的表达可能存在多种可能性：首先，MAVS基因3′UTR

序列发生改变后，可能使原来能与之结合发挥表达调控作用或影响RNA稳定性的

microRNA或者lncRNA不能顺利结合；或者，3′UTR区域的RNA还可能与

RNA结合蛋白相互作用，此处位点的改变使蛋白结合能力发生改变而产生影响。

众所周知MAVS在机体的天然免疫信号通路中发挥重要的调节作用，而ADAR2

可对其表达进行抑制，所以ADAR2在很多病毒免疫方面的功能作用值得深入探究。

而ADAR2除了有RNA编辑功能外，也可能通过其RNA结合蛋白的功能影响

RNA的稳定性[6]。另外，ADAR2是否同样具有直接的RNA相互作用等功能[7-

8]，也为研究ADAR2基因的功能提供了新的思路。

【相关文献】

[1]SavvaYA,RiederLE,Rproteinfamily[J].GenomeBiol,2012,13:1-

10.