occludin是什么意思ludin在线翻译读音例

分类号ＵＤＣ密级博士学位论文ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路在缺氧诱导的外

层血一视网膜屏障损伤中的作用ＴｈｅＲｏｌｅｏｆＭＥＫ／ＥＲＫｓｉｎ

ｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｉｎＨｙｐｏｘｉａ－ＩｎｄｕｃｅｄｏＢＲ

Ｂｂｒｅａｋｄｏｗｎ作者姓名：刘燕学科专业：眼科学学院（系、所）：湘

雅医院指导教师：许雪亮教授论文答辩日期兰竺！岁一一席静争１。。。。。。。。。。。

„—Ｊ中南大学：ｏ一二年五月＼～原创性声明四Ｙ２四１９７７四７０Ⅻ本

人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。

尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发

表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用

过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。

作者签名：查』壅日期：二！！：一年—！月２日学位论文版权使用授权书本

人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根

据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可

以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。

同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据

库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：韭导师签名赴日期：业年』

月卫日ｐ文摘妻摘要第一章缺氧条件下ＡＲＰＥ一１９细胞中ＭＥＫ／ＥＲＫ

信号传导通路与细胞间紧密连接蛋白的变化目的建立ＡＲＰＥ．ｉ９细胞缺氧模

型，探讨缺氧条件卜视网膜色素ｒ皮９８胞（ｒｅｔｉｎａｐｉｇｍｅｎｔｅｐ

ｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路与卸ｌ胞问紧密连接蛋

白的改变，以及影响紧密连接的血管内皮生长吲ｆ（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏ

ｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＶＥＧＦ）的变化。方法ＡＲＰＥ

一１９细胞复苏后取对数生长期细胞，利用化学制剂二氯化钻（ＣｏＣＩ：）诱导

其缺氧模型。将细胞培养于６０ｘ１５ｍｍ细胞培养皿中，取６份细胞随机均分为

缺氧纽和正常对照组，缺氧组培养摹－＋ｔ加入浓度为２００ｕＭ的二氯化钴（Ｃ

ｏＣｌ２），而正常春来遍是桃花水 对照组中加入等量的．１｜Ｊ基亚砜（ＤＭＳＯ）。３小时后

利用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测各组细胞‟Ｔ】缺氧诱导因子（ｈｙｐｏｘｉａｉ

ｎｄｕｃｉｂｌｅｆａｃｔｏｒ－ｌａ，ＨＩＦ一１Ⅱ）以明确细胞缺氧情况，之

后以ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测在缺氧环境下ＡＲＰＥ细胞一扣ｐ－ＥＲＫ／

ｔ－ＥＲＫ的随时间变化曲线（每间隔０５小时检测一次，共３小时），２４小日

Ｊ检测细胞问紧密连接蛋白之ｒ的密封蛋白（ｏｃｃｌｕｄｉｎ）的变化，并于３，

６，１２，２４小时利用ＥＬＩＳＡ检测细胞培养液－｝ｚ细胞分泌的ＶＥＧＦ的

刚问变化曲线。结果ＣｏＣｌ２诱导的缺氧条件一卜，３小时检测ＨＩＦ．１ａ明

显增高，为正常对照组的１５７倍，差异有统计学意义（卢＜０００１）。缺氧

条什下ＡＲＰＥ—１９细胞中ｐ－ＥＲＫ蛋ｔ‟ｔ表达量随时间推移，白１５小时

起较正常纽逐渐增多，约丁２５小叫州达到顶峰，随后逐渐回落，与正常组蛋白表

达量相比，缺氧情况下高峰时ｐ－ＥＲＫ蛋白表达颦增加了约４．１２倍（ｐ＜００

０１）。而ｔ－ＥＲＫ在缺氧及正常情况下总量不变（ｐ＞００５）。缺氧组细Ｉ

ｌＳｆｉ】ｏｃｃｌｕｄｉｎ蛋白的表达量较正常组减少ｒ５３３％，差异有统

计学意义（ｐ＜０００１）。分别在３，６，１２，２４小刚时检测到缺氧组与正

常对照组培养液。｜〕ＶＥＧＦ含量（ｐｇ／ｍ１）分别为：５７４２１２７６

０Ｖｓ５７２．２１４９６６：９３９３４５８７９ＶＳ６４２８４２

３９８，；１２９４６２士１Ｉ．１５ＶＳ９５２６９２９４１；１８２

０３１４９６８ＶＳｌ５８７１５５４５７，统计学分析表明３小时前缺氧

组与正常纽ＶＥＧＦ的表达无统计学差异（ｐ＞００５）；６，１２，２４小时缺

氧纰ＶＥＧＦ表达均较正常组增多，差异有统计学意义（ｐ＜０叭）。结论ＣｏＣ

Ｉｚ诱导ＡＰＲＥ一１９细胞的缺氧模型是成功的。缺氧条件博士学位论文，｛Ｊ

文摘要下，ＡＲＰＥ．１９细胞中的ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路被澈活，密封蛋

白ｏｃｃｌｕｄｉｎ被破坏，而ＶＥＧＦ的表达增多。中文摘要第二章阻断ＭＥＫ

／ＥＲＫ信号传导通路对缺氧条件下ＡＲＰＥ一１９细胞间紧密连接的保护作用

目的探讨阻断缺氧条件下ＡＲＰＥ一１９细胞中ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路的激

活对ＶＥＧＦ分泌的影响及细胞间紧密连接蛋白的保护作＿Ｌ｝ｊ。方法按第„章

所述方法将同一批对数生长期ＡＲＰＥ一１９细胞共１２份，随机均分为缺氧组和

正常组，两组。｜１又分为ＭＥＫ抑制剂ＰＤ９８０５９于预组和ＤＭＳＯ对照组，

分别于培养液中加入浓度为２０ｐＭ的ＰＤ９８０５９及等量ＤＭＳＯ预１．预１

小时，每组重复３份。沿用上一章中各时问点，以Ｗｅｓｔｅｒｎｂｏｌｔ检测各

组细胞表达的ｐ－ＥＲＫ／ｔ．ＥＲＫ以确定ＰＤ９８０５９对ＡＲＰＥ一１９细

胞巾ＭＥＩＣＪＥＲＫ信号通路的阻ｉ卜作Ｊ＝ｆｊ，之后运ＨｊＷｅｓｔｅｒｎ

Ｂｌｏｔ检测细胞‟ｌＨＩＦ一１Ⅱ，ｏｃｃｌｕｄｉｎ表达，及ＥＬＩＳＡ７检

测培养液巾ＶＥＧＦ，对比阻断ＭＥＫ／ＥＲＫ信号通路前后这些蛋白的变化情况。

最后采用２０，３０，４０／．ｔＭ三种浓度的ＰＤ９８０５９对剂量依赖性进行

榆测。结果ＣｏＣｌ２Ｔ预２５小时检测ｐ－ＥＲＫ表达峰值发现．缺氧组－１〕

２０ｐＭＰＤ９８０５９十预后的ｐ－ＥＲＫ的表达较无ＰＤ９８０５９下预组

减少约５２０６％，差异有统计学意义（ｐ＜０００Ｉ）；而正常组巾ＰＤ９８

０５９二卜预后ｐ－ＥＲＫ的含睦与无干予负组问无统计学差异（ｐ＞００５）。

ＣｏＣｌ２干预３小时检测ＨＩＦ－ｌｅｔ，缺氧组ＰＤ９８０５９干预前后ＨＩ

Ｆ—ｌａ的分别为正常对照组的１５文天祥过零丁洋的故事 ７倍及１５２倍，两颜氏家训教子篇翻译 组问无统计学差异（ｐ

＞０．０５）。ＥＬＩＳＡ检测３，６，１２，２６小时ＶＥＧＦ含量表明，缺氧

组中自６小时起各时问点ＰＤ９８０５９干预ｌ：｜【ＶＥＧＦ表达较无ＰＤ９８

０５９干预组下降，差异有统计学意义（芦＜０００１），向止常５１１ＰＤ９

８０５９干预前后ＶＥＧＦ表达无统计学差异（卢＞００５）。２４小时检测ｏｃ

ｃｌｕｄｉｎ的含量，缺氧组巾ＰＤ９８０５９ｆ预后其岔量明显升高，由尤干预

州ＤＭＳＯ对照组的４６７％（ｐ＜０００１）上升到８０３％（ｐ＜０．００

５）。剂量依赖实验表明，当ＰＤ９８０５９剂量由２０“Ｍ提高到３０９Ｍ时，其

对缺氧组ｐ－ＥＲＫ的抑制效率由６０１％提高到９４８％，同叫ｏｃｃｌｕｄ

ｉｎ的表达量…ＤＭＳＯ组的８０１％提高到９９Ｏ％，差异有统计学意义（ｐ

＜Ｏ００１），４０９Ｍ与３０“ＭＰＤ９８０５９对ｐ－ＥＲＫ及ｏｃｃｌｕｄ

ｉｎ的影响比较，差异无统计学意义（ｐ＞Ｏ０５）。递增ＰＤ９８０５９浓度后

对缺氧组的ＶＥＧＦ含量的抑制差异无统计学差异（ｐ＞ｏ０５）。结渡江战役 论阻断缺

氧环境下ＡＲＰＥ．１９细胞ｌ”ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路后，对ＨＩＦ．１Ⅱ

的升高无影响，但使ＶＥＧＦ的分泌显著下降，降低了博士学位论文ｔＩ，文摘要

细胞间紧密连接蛋白ｏｃｃｌｕｄｉｎ的破坏，并且对ｏｃｅｌｕｄｉｎ的保护与

对ＭＥＫ／ＥＲＫ信号通路的阻断具有相平行的剂量依赖性。中文摘要第三章阻

断ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路对ＯＩＲ小鼠模型外层血一视网膜屏障的保护作

用目的将体外实验结果进一步于体内实验－｜ｊ证实，利用缺氧诱导的视网膜病

变（ｏｘｙｇｅｎ－ｉｎｄｕｃｅｄｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＯＩＲ）小鼠模型，

观察阻断ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路后对缺氧诱导的外层血．视网膜屏障渗漏

的保护作用。方法将１８只新生小鼠随机分为３组，即ＯＩＲ组，ＯＩＲ＋ＰＤ９

８０５９毋ｉ及正常对照纽。ＯＩＲ组于第７灭（Ｐ７）至第１２犬（Ｐ１２）放

置丁氧气浓度为７５％ｉ（，２氧舱内，之后自氧舱叶〕取出置于室内普通环境下

至出生后第１７天（Ｐ１７），ＯＩＲ＋ＰＤ９８０５９组于取ＯＩＲ小鼠于Ｐ１

３至Ｐ１７腹膜下注射ＰＤ９８０５９，正常对照组于Ｐ１３至Ｐ１７腹膜下注射

等剂量的ＤＭＳＯ。采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分别检测Ｐ１３－Ｐ１７各组小

鼠ＲＰＥ层中ｔ－ＥＲＫ／ｐ－ＥＲＫ，ＨＩＦ－１ｑ，ＶＥＧＦ及ｏｃｃｌｕｄ

ｉｎ蛋白表达，免疫荧光化学检测各纽ＲＰＥ铺”ｌ｛；＿Ｊｏｃｃｌｕｄｉｎ蛋

白的分布情况，ＦＩＴＣ－Ｄｅｘｔｒａｎ脸测ＯＩＲ小鼠外层ｍ－视网膜屏障（ｏ

ＢＲＢ）ｆｌｑ渗漏以及阻断ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路后对ｏＢＲＢ渗漏的保

护作用。结果ＯＩＲ小鼠Ｐ１３一Ｐ１７的ＨＩＦ—ｌｅｔ，Ｐ—ＥＲＫ及ＶＥ

ＧＦ蛋门的表达均较正常小鼠升高，分别于Ｐ１３，Ｐ１４，Ｐ１５达到高峰。以

表达高峰时各蛋白的表达做统计学分析，三种蛋白分别升高丁２２６倍．１９９

倍及１７８倍，差异有统计学意义（ｐ＜Ｏ００１），而Ｐ１７检测ｏｃｃｌｕ

ｄｉｎ蛋白的表达，ＯＩＲ纽减少，仪为正常组的３６２％，差异有统计学意义（口

＜Ｏ００１），免疫荧光化学址示正常小鼠上ＲＰＥ较强且边界清晰完整的ｏｃｃ

ｌｕｄｉｎ免疫荧光反应，ＯＩＲ小鼠细胞间ｏｃｃｌｕｄｉｎ免疫荧光反应玎ｉ

仅在强度上减弱，并且边界变得模糊且有多处缺损。腹膜下注射ＰＤ９８０５９后，

取各篮门表达高峰时间点各蛋白的表达做统计学分析，ｐ－ＥＲＫ及ＶＥＧＦ表达

较ＯＩＲ组分别下降４９．４％及３５４％（ｐ＜０００１），且与正常组问比

较差异无统计学差异（ｐ＞０．０５），而ＨＩＦ．１ａ的表达为川：常组的２１

２倍，与ＯＩＲ组间无统计学差异（ｐ＞００５）。检测Ｐ１７利该组Ｏｃｃｌ

ｕｄｉｎ蛋白，较ＯＩＲ组有明显升高，上升Ｉ幅度为３５５％，两组问差异有统

计学意义缤组词有哪些 （ｐ＜０００５），Ｈ免疫组织化学检测ｏｃｃｌｕｄｉｎ免疫荧光反应

强度增强，且少有缺损。利用ＦＩＴＣ－Ｄｅｘｔｒａｎ检测ＯＩＲ组及ＯＩＲ＋

ＰＤ９８０５９组小鼠外层血．视网膜屏障的渗漏情况，腹膜下注射ＰＤ９８０５

９的ＯＩＲ小鼠，ｏＢＲＢ的渗漏点较ＯＩＲ组明显减少，渗漏点数值为３６４

２０４】尊士学位论文中文摘要ｖｓｌ００６２９１，下降了７３４％，两

组问差肄有统计学意义（ｐ„０００５）。结论体内实验证实，腹膜下注射ＰＤ９

８０５９后有效的阻断小鼠缺氧条件下ＲＰＥ层中ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路的

激活，同时ＶＥＧＦ的分泌被抑制，减少了ｏｃｃｌｕｄｉｎ蛋白的破坏以及ｏＢ

ＲＢ的渗漏，裕龋保疲保涞纳呶抻跋臁９丶剩停牛耍牛遥诵藕糯纪

罚毖酰粒遥校牛保瓜赴希桑倚∈?外层血一视网膜屏障，ＶＥＧＦ，ＨＩ

Ｆ－ｌａ英文摘耍ＡｂｓｔｒａｃｔＣｈａｐｔｅｒ１Ｃｈａｎｇｅｓｏｆ

ＭＥＫ／ＥＲＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙａｎｄｔｉｇｈｔｊｕ

ｎｃｔｉｏｎｉｎＡＲＰＥ一１９ｃｅｌｌｌｉｎｅｕｎｄｅｒｈｙｐｏｘ

ｉａｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｂｊｅｅｔｉｖｅＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｈ

ｙｐｏｘｉａｍｏｄｅｌｏｆＡＲＰＥ一１９ｃｅｌｌ，ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔ

ｅｔｈｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆＭＥＫ／ＥＲＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐ

ａｔｈｗａｙ，ｔｉｇｈｔＪｕｎｃｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎａｎｄＶＥＯＦ

ｉｎＲＰＥｃｅｌｌｕｎｄｅｒｈｙｐｏｘｉａｃｏｎｄｉｔｉｏｎＭｅｔ

ｈｏｄｓＣｏＣｌ２ｗａｓｕｓｅｄｔｏｉｎｄｕｃｅｈｙｐｏｘｉａｍｏ

ｄｅｌＳｉｘｄｉｓｈｅｓｏｆＡＲＰＥ－１９ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｒａｎ

ｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐａｎｄｎｏ

ｎ—ｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐＣｅｌｌｓｏｆＨｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐ

ｗａｓｃｕｌｔｕｒｅｄｉｎＤＭＥＭｗｉｔｈ２００ｐＭＣｏＣｌ２ｔｏ

ｍ经典诗句大全 ｉｍｉｃｃｈｅｍｉｃａｌｈｙｐｏｘｉａｗｈｉｌｅｃｅｌｌｓｏｆｎ

ｏｎ－ｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐｃｕｌｔｕｒｅｄｉｎＤＭＥＭｗｉｔｈ

ｓａｍｅｄｏｓｅｏｆＤＭＯＳＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔａｎａｌｙｓｉｓ

ｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＨ

ＩＦ一１Ⅱ，ｐ－ＥＲＫ／ｔ—ＥＲＫａｎｄｏｃｅｌｕｄｉｎ，ＥＬＩＳＡｗ

ａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔＯｄｅｔｅｃｔＶＥＧＦｓｅｃｒｅｔｅｄｔｏ

ｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉａＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｒｅｗａｓａｓｉｇｎｉ

ｆｉｃａｎｔｅｌｅｖａｔｉｏｎｏｆＨＩＦ－ｌａｉｎｈｙｐｏｘｉａｇｒ

ｏｕｐ，ａｂｏｕｔ１５７ｔｉｍｅｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｎ－

ｈｙｐｏｘｉａｃｏｎｔｒｏｌｓ（Ｐ„０００１），ｗｈｉｃｈｉｎｄｉｃａｔ

ｅｔｈａｔｔｈｅｈｙｐｏｘｉａｍｏｄｅｌｗａｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ

Ｕｎｄｅｒｔｈｅｈｙｐｏｘｉａｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｐ－ＥＲＫａｎｄＶ

ＥＧＦｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ，ｗｈｉｌｅｏｃｃｌ

ｕｄｉｎｄｅｃｒｅａｓｅｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｎｏｎ－ｈｙｐｏｘ

ｉａｃｏｎｔｒｏｌｓｆＰ„Ｏ００１、ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＣｏＣｌ２ｉ

ｎｄｕｃｅｄｈｙｐｏｘｉａｍｏｄｅｌｏｆＡＲＰＥ一１９ｃｅｌｌｗａ

ｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌＵｎｄｅｒｔｈｅｈｙｐｏｘｉａｃｏｎｄｉｔｉｏ

ｎ，ｔｈｅＭＥＫ／ＥＲＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｗａｓａｃｔ

ｉｖａｔｅｄ，ｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆＶＥＧＦｗａｓｕｐ—ｒｅｇｕｌａ

ｔｅｄａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｏｃｅｌｕｄｉｎｐｒｏｔｅｉｎｗ

ａｓｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ英文摘受Ｃｈａｐｔｅｒ２Ｔｈｅｒｏ

ｌｅｏｆｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇＭＥＫ／ＥＲＫｐａｔｈｗａｙｆｏｒｔｉ

ｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＡＲＰＥ一１９ｃｅｌｌｓｕｎｄ

ｅｒｈｙｐｏｘｉａｃｏｎｄｉｔｉｏｎＯｂｊｅｃｔｉｖｅ九九重阳节 Ｔｏｉｎｖｅ

ｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｒｏｌｅｏｆｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇＭＥＫ／ＥＲＫ

ｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｆｏｒｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎｂｅ

ｔｗｅｅｎＡＲＰＥ－１９ｃｅｌｌｓｕｎｄｅｒｂｙｐｏｘｉｃｏｎｄｉｔ

ｉｏｎＭｅｔｈｏｄｓＡＲＰＥ－１９ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌ

ｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐａｎｄｎｏｎ—ｈｙ

ｐｏｘｉａｇｒｏｕｐ，ａｎｄｂｏｔｈｇｒｏｕｐｓｔｈｅｎｄｉｖｉｄｅ

ｄｉｎｔｏＰＤ９８０５９（２０９Ｍ）ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐ

ａｎｄＤＭＳＯｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔａｎａ

ｌｙｓｉｓｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｅｘｐｒｅｓｓｉ

ｏｎｏｆＨＩＦ—ｌａ，ｐ－ＥＲＫ／ｔ—ＥＲＫａｎｄｏｃｄｕｄｉｎ，ＥＬ

ＩＳＡｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔＶＥＧＦｓｅｃｒｅｔ

ｅｄｔｏｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉａＡｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ，ｗｅｐ

ｅｒｆｏｒｍｅｄｄｏｅｓｃｏｕｒｓｅｏｆＰＤ９８０５９ｗｉｔｈ２０

－４０ｐＭｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓＲｅｓｕｌｔＭＥＫ／ＥＲＫｉｎ

ｈｉｂｉｔｏｒＰＤ９８０５９ｒｅｄｕｃｅｄＥＲＫｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌ

ａｔｉｏｎｓｅｖｅｒｅｌｙｉｎｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐ，ｆｒｏｍ５０

９ｔｉｍｅｓｏｆｃｏｎｔｒｏｌｒｅｄｕｃｅｄｔｏ２４４ｔｉｍｅｏ

ｆｃｏｎｔｒｏｌ，ｄｅｃｌｉｎｅｄａｂｏｕｔ５２０６％，ｂｕｔｔｈｅ

ｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔｉｎｎｏｎ—ｈｙｐ

ｏｘｉａｇｒｏｕｐ（ｐ＞００５）ＰｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈＰＤ

９８０５９ｗａｓｎｏｔｅｆｆｅｃｔｉｖｅｉｎｒｅｄｕｃｉｎｇｈｙｐ

ｏｘｉａ－ｉｎｄｕｃｅｄＨＩＦ－１Ⅱｉｎｂｏｔｈｈｙｐｏｘｉａｇｒｏ

ｕｐａｎｄｎｏｎ－ｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐＯｎｔｈｅｏｔｈｅｒｈａ

ｎｄｉｔｂｌｏｃｋｅｄｈｙｐｏｘｉａ－ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄＶＥＧＦｓ

ｅｃｒｅｔｉｏｎｆｒｏｍ６ｈｏｕｒｔｉｍｅｐｏｉｎｔｉｎｈｙｐｏ

ｘｉａｇｒｏｕｐｗｈｉｌｅｈａｖｅｎｏｅｆｆｅｃｔｏｎｎｏｎ—ｈｙ

ｐｏｘｉａｇｒｏｕｐＤｅｔｅｃｔｔｈｅｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎｐ

ｒｏｔｅｉｎｏｃｃｌｕｄｉｎａｆｔｅｒｈｙｐｏｘｉａｉｎｊｕｒｙａｔ

２４ｈｏｕｒｔｉｍｅｐｏｉｎｔ，ｔｈｅｒｅｗａｓｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ

ｅｆｆｅｃｔｏｆＰＤ９８０５９ｔｏｐｒｏｍｏｔｅｔｈｅｏｅｃｌｕｄ

ｉｎｃｏｎｔｅｎｔｆｒｏｍ４６７％（ｐ＜０００１）ｔｏ８０３％（ｐ„０

００５）ｃｏｍｐａｒｅｄｏｆｎｏｎ—ｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐＡｔｔｈ

ｅｍｅａｎｔｉｍｅ，ｔｈｉｓｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｉｓｄｏｅｓｄｅｐｅ

ｎｄｅｎｔｔＯＯ，ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｔｏｔｈｅｄｏｅｓｄｅｐ

ｅｎｄｅｎｔｒｅｄｕｃｅｏｆＥＲＫｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎＣｏ

ｎｃｌｕｓｉｏｎＰｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈＰＤ９８０５９ｗａｓ

ｎｏｔｅｆｆｅｃｔｉｖｅｉｎｒｅｄｕｃｉｎｇＨＩＦ—ｌａｕｎｄｅｒ

ＣＯＣｌ２ｉｎｄｕｃｅｄｈｙｐｏｘｉａｃｏｎｄｉｔｉｏｎＭＥＫ／ＥＲ

ＫｉｎｈｉｂｉｔｏｒＰＤ９８０５９ｒｅｄｕｃｅｄＥＲＫｐｈｏｓｐｈｏ

ｒｙｌａｔｉｏｎｓｅｖｅｒｅｌｙ，ａｎｄｉｔｉｓａｌｓｏ觅的拼音 ａｄｏｅｓ

ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｅｆｆｅｃｔＯｎｔｈｅｏｔｈｅｒｈａｎｄｉｔｂ

ｌｏｃｋｅｄｈｙｐｏｘｉａｓｔｉｍｕｌａｔｅｄＶＥＧＦｓｅｃｒｅｔｉ

ｏｎＰＤ９８０５９ｐｒｏｔｅｃｔｅｄｔｈｅｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏ

ｎｐｒｏｔｅｉｎｏｃｃｌｕｄｉｎｆｒｏｍｈｙｐｏｘｉａｉｎｊｕｒｙ，

ａｔｔｈｅｍｅａｎｔｉｍｅ，ｔｈｉｓｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｉｓｄｏｅ

ｓｄｅｐｅｎｄｅｎｔｔＯＯ，ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｔｏｔｈｅｄｏ

ｅｓｄｅｐｅｎｄｅｎｔｒｅｄｕｃｅｏｆＥＲＫｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔ

ｉｏｎ英文摘要Ｃｈａｐｔｅｒ３Ｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｒｏｌｅ

ｏｆｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇＭＥＫ／ＥＲＫｐａｔｈｗａｙｆｏｒｏＢＲＢ

ｏｆＯＩＲｍｏｕｓｅＯｂｉｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔ

ｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｒｏｌｅｏｆｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇＭＥ刚ＥＲ

ＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｆｏｒｏＢＲＢｂｒｅａｋｄｏｗｎ

ｊｎＯＩＲｍｏｕｓｅＭｅｔｈｏｄｓＡｗｅｌｌ—ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅ

ｄｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌｏｆＯＩＲｗａｓｕｓｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉ

ｇａｔｅｔｈｅｒｏｌｅｏｆＭＥＫ厄ＲＫｐａｔｈｗａｙ．１８ｎｅｗｂ

ｏｒｎｍｏｕｓｅｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏＯＩＲｇｒｏｕｐ，Ｏ

ＩＲ＋ＰＤ９８０５９ｇｒｏｕｐａｎｄｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒ

ｏｕｐＴｈｅｍｏｕｓｅｏｆＯｉＲ＋ＰＤ９８０５９ｇｒｏｕｐｗａｓｉ

ｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｉｎｊｅｃｔｅｄｗｉｔｈＰＤ９８０５９ａ

ｔａｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ６５ｍｇ／ｋｇｄｉｓｓｏｌｖｅｄ

ｉｎ１０ｕＬＤＭＳＯｆｒｏｍ１２ｔｏｉ６ｐｏｓｔｎａｔａｌｄａｙ

ｓｗｈｉｌｅｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎ

ｅａｌｉｎｊｅｃｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｓａｌｌａｅｖｏｌｕｍｅｏｆＤ

ＭＳＯＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅ

ｄｔｏｄｅｔｅｃｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＨＩＦ一１ａ．Ｐ—ＥＲＫ＾。

ＥＲＫ．ⅦＧＦａｎｄｏｅｃｌｕｄｉｎｆｒｏｍＰ１３ｔｏＰ１７ｉｎ

ＲＰＥｌａｙｅｒｏｆｍｏｕｓｅｅｙｅｂａｌｌｌｍｍｕｎｏ—ｆｌｕｏ

ｒｅｓｃｅｎｃｅｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔ

ｔｈｅｏｃｃｌｕｄｉｎｌｏｃａｔｉｏｎｉｎＲＰＥｌａｙｅｒ．Ｔｈｅｄ

ｅｇｒｅｅｏｆｏｕｔｅｒ－ｂｌｏｏｄｒｅｔｉｎａｂａｒｒｉｅｒｂｒ

ｅａｋｄｏｗｎｉｎｖｉｖｏｗａｓｑｕａｎｔｉｆｉｅｄｂｙｃｏｕｎｔ

ｉｎｇｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｓｅｖｅｒｅｌｙｄａｍａｇｅｄｂｒｅａ

ｋｐｏｉｎｔｓｏｆＦＩＴＣ－ＤｅｘｔｒａｎｉｎｔｈｅＲＰＥＲｅｓｕｌ

ｔＴｈｅｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｌｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｐ

－ＥＲＫ．ＨＩＦ一１ａａｎｄＶＥＧＦｗｅｒｅａｃｔｉｖａｔｅｄｉｎＯ

ＩＲｍｏｄｅｌＴａｋｅｔｈｅＰ１３ｆｏｒｓｔａｔｉｓｔｉｃａｎａ

Ｉｙｚｅ、ｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｔｈｅｓｅｐｒｏｔｅｉｎｗｅｒｅ

ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｌｙ１９９ｔｉｍｅｓ．２２ｔｉｍｅｓａｎｄ１

７８ｔｉｍｅｓｃｏｍｐａｒｅｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒ

ｏｕｐ（口＜０００１）Ｆｏｒｔｈｅｏｃｃｌｕｄｉｎ．ｗｅｄｅｔｅｃｔ

ｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｔＰ１７Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉ

ｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｉｎＯＩＲｍｏｕｓｅｏｃｃｌｕｄｉｎｗａｓ

ｄｅｃｒｅａｓｅｔｏａｌｍｏｓｔ３６２％ｏｆｎｏｒｍａｌｍｏｕｓｅ

Ｕｓｉｎｇｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｔｏｄｅｔｅｃｔｔ

ｈｅｉｎｔｅｇｒａｌｉｔｙｏｆｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎ，ｒｅｓｕｌ

ｔｓｒｅｖｅａｌｅｄｔｈａｔｂｏｔｈｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｌｏｃａｌ

ｉｚａｔｉｏｎｏｆｏｃｃｌｕｄｉｎａｔｔｈｅｐｌａｓｍａｍｅｍｂｒ

ａｎｅｗｅｒｅｒｅｄｕｃｅｄｉｒｌｔｈｅＯＩＲｍｉｃｅＡｔｉｅｒ

ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｉＮｅｃｔｅｄｗｉｔｈＰＤ９８０５９ｔ

ｏＯＩＲｍｏｕｓｅ．ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｔｅｆｆｅｅｔｉｖｅ１ｎｒ

ｅｄｕｃｉｎｇｈｙｐｏｘｉａ－ｉｎｄｕｃｅｄＨＩＦ一１ｎｉｎｂｏｔｈ

ＯＩＲｇｒｏｕｐａｎｄ０１Ｒ＋ＰＤ９８０５９ｇｒｏｕｐＴｈｅｒｅｗ

ｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｏｆｐ－ＥＲＫａｎｄＶ

ＥＧＦｉｎＯＩＲ＋ＰＤ９８０５９ｇｒｏｕｐｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈ

ＯＩＲｇｒｏｕｐＴｈｅＩｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｒｎｉｓｔｒｙａｎｄ

ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｌｏｃａｌｉｚａ

ｔｉｏｎａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｏｆｏｃｃｌｕｄｉｎａｔｔｈｅｐｌａ

ｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅｗａｓｐｒｏｔｅｃｔｅｄｂｙｔｈｅＰＤ９８０

５９：ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｏｃｃｌｕｄｉｎｗａｓｕｐ－ｒｅｇｕｌ

ａｔｅａｂｏｕｔ３５５％ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＯＩＲｇｒｏｕ

ｐ．ａｎｄｔｈｅｉｍｍｕｎｅ—英文摘要ｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｉ

ｎｔｅｎｓｅｉｎｔｈｅｉｒｌＯＩＲ＋ＰＤ９８０５９ｍｉｃｅｃｏｍｐ

ａｒｅｄｗｉｔｈＯＩＲｍｏｕｓｅＵｓｉｎｇＦＩＴＣ——Ｄｅｘｔｒａｎ

ａｓｔｈｅｍａｒｋｅｒ，ｗｅｏｂｓｅｒｖｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅａｒ

ｅｓｅｖｅｒａｌｂｒｅａｋｐｏｉｎｔｔｈａｔ１ｅａｄｔｈｅＦＩＴＣ

ＤｅｘｔｒａｎｌｅａｋｉｎｇｆｒｏｍｔｈｅＲＰＥｔｏｏｕｔｓｅｇｍ

ｅｎｔｏｆｒｅｔｉｎａＡｆｔｅｒＰＤ９８０５９ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔ

ｏｎｅａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ｔｈｅｂｒｅａｋｐｏｉｎｔｎｕｍｂｅｒｗ

ａｓ３６４士２．０４ｖｓ１００６２９１．ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｂ

ｒｅａｋｐｏｉｎｔｒａｔｉｏｉｆｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕ

ｃｅｄ７３４％ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＭＥＫ．ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｎｈｉｎ

ｔｅｒＰＤ９８０５９ｅａｒｌｉｎｈｉｂｉｔＭｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ

ＭＥＫ／ＥＲＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａＩｈｗａｙ．山ｅｎｄｅｃｒｅａｓｅ

ｔｈｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆＶＥＧＦｌｎＲＰＥｒｅｄｕｃｅｔｈｅ

ｌｏｓｉｎｇｏｆｏｃｃｌｕｄｉｎ，ｐｒｏｔｅｃｔｔｈｅｂｒｅａｋｄｏｗ

ｎｏｆｏＢＲＢｉｎｈｙｐｏｘｉａｃｏｎｄｉｔｉｏｎＫＥＹＷＯＲＤＳ

ＭＥＫ／ＥＲＫｓｉｎｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ，ｈｙｐｏｘｉａ，ＡＲ

ＰＥ一１９ｃｅｌｌｓ，ＯＩＲｍｏｕｓｅ，ｏＢＲＢ，ＶＥＧＦ，ＨＩＦ一１

Ⅱ堕兰兰堡堡皇旦墨目录摘要ＩＡｂｓｔｒａｃｔ．．．．．．．．惠崇春江晓景其二赏析 ．，．．Ｖ

ＩＩ中英文对照ＸＩＩ刖茜Ｉ第一章缺氧条件下ＡＲＰＥ一１９细胞中ＭＥＩ＜

ｖＥＲＫ号传导通路与细胞问紧密连接蛋白的变化３１１材料５方法…３

１２结果…９ｌ３讨论１２１４小结１５第二章阻断ＭＥＫ／ＥＲＫ信

号传导通路对缺氧条件下ＡＲＦＥ．１９细胞间紧南连接的保护作用．．１６２

１材料与方法１６２．２结果２２２．３讨论２７２．４小结……３０第

三章阻断ＭＥＩ“ＥＲＫ信号传导通路对ＯＩＲ小鼠模型中外层血．视网膜屏障的保

护作用３ｌ３１材料与方法３Ｉ３．２结果…３７３３讨论４２３．４

小结４５结论…４６参考文献４７综述５４致谢８０攻读学位期间的主要研

究成果．．８１博士学位论文中英文刑照中英文对照眸士学位论文前喜刖舌

血视喇膜屏障（ｂｌｏｏｄ．ｒｅｔｉｎａｂａｒｒｉｅｒ，ＢＲＢ）由内层血．视

蚓膜群障（ｉｎｎｅｒｂｌｏｏｄ－ｒｅｔｉｎａｂａｒｒｉｅｒ，ｉＢＲＢ）及

外层血一视网膜屏障（ｏｕｔｅｒｂｌｏｏｄ．ｒｅｔｉｎａｂａｒｒｉｅｒ，

ｏＢＲＢ）组成，在维持视Ｍ膜内环境稳定方面起若非常重要的作用【１，７１。

ｉＢＲＢ由视例膜毛细血管内皮细胞硬细胞问紧膏连接（Ｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉ

ｏｎ，Ｔｊ）构成，星形胶质细胞及Ｍｆｉｌｌｅｒ细胞也在维持ｉＢＲＢ的正常

功能中起了重要作用口，”。目前对ｉＢＲＢ的研究较为深入和全由，人们发现在糖

尿病视删膜病变，视删膜中央静脉栓塞以及缺氧性视Ｊ叫膜病变中都存在ｉＢＲＢ

的损害Ｈ５。６】。在这些疾病过程中，组织缺血缺氧引起视网膜巾血管内皮生长

因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，

ＶＥＧＦ），氧化氯（Ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，Ｎｏ），自由基，炎症因子升

高以及血液动力学改变．造成了视瑚麒新生皿管形成以及血管通透性增加，即ｉＢ

ＲＢ的破坏１６Ｊ８９Ⅲ。ｏＢＲＢ由视网膜色素上皮细胞（ｒｅｔｉｎａｐｉ

ｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）及其细胞间的紧密连接构成ｔｔ２１

正常情况Ｆ，ＲＰＥ细胞将脉络膜内血管里丰富的葡萄糖等背养物质转运到外层视

刚膜，并将视｜ｊ【司膜的代谢产物及多余水分等从视州膜下腔中转运至脉络膜血

管中带走，崮此ｏＢＲＢ在维持视嘲膜内环境上１ｉｉＢＲＢ同样具有不可或缺的

作用ｉ”。目前大多学者认为，ｏＢＲＢ较ｉＢＲＢ更能耐受缺血缺氧环境，在视删

膜缺血缺氧的动物模型中，研究人员观察到当ｉＢＲＢ被破坏时ｏＢＲＢ还是保持

完整，只是ＲＰＥ细胞间隙变大，因此ｉＢＲＢ的损害在疾病初期就ｂ，以明显观

察到．而ｏＢＲＢ的损害在疾病铷期较为局限．或主要表现在疾病发展的后期，钳

如糖尿病视嘲膜痫变（ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＤＲ）后期大

范围的视州膜脱离，黄斑水肿等Ｉ”。ＨｕｉｚｈｕｏＸｕｆｌ”在研究中证实，缺

氧诱导的视网膜病变（ｏｘｙｇｅｎ．ｉｎｄｕｃｅｄｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ．Ｏ

ＩＲ）小鼠以及糖尿病视古筝演奏视频 例膜病变小鼠中，ｏＢＲＢ被破坏而出现渗漏：而在年龄

俄相关陡视嘲膜病变（ａｇｅ－ｒｅｌａｔｅｄｍａｅｕｌａｒｄｅｇｅｎｅｒａ

ｔｉｏｎ，ＡＲＭＤ），早产儿视网膜病变（ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙｏｆｐｒｅ

ｍａｍｒｉｔｙ，ＲＯＰ）也部存在ｏＢＲＢ的不同程度的破坏。和其他极化的上

皮细胞一样．＝【竿：ＲＰＥ细胞中，紧密连接在相邻细胞的顶部形成的带状结构，

在顶部和基底都之恒ｌ构筑了条屏障，即我们所说的ｏＢＲＢ（”】。构成紧密连

接的蛋白主要包括：ｏｃｃｌｕｄｉｎ，ＺＯ一１，ＺＯ．２，Ｃｌａｕｄｉｎ，

ＪＡＭ－Ａ等，这其中ｏｃｃｌｕｄｉｎ是目前热门的重要蛋白之一【Ｉ”。Ｏｃｃ

ｌｕｄｍ又称为密封蛋白．是一种唉本体蛋白，主要由四个跨膜段，二三个胞内段

（包扦一个长ＣＯＯＨ。端，一个短ＮＨ：一端，个细胞内弯曲）以及两个细胞外

环状结构组成。ｏｃｃｌｕｄｉｎ蛋白的ＣＯＯＨ．端在各种哺乳动物中足相对保

守的结构，它与ＺＯ－１相互绑定存起，与细胞骨架相连〔６】．并且ｏｃｃｌｕ

ｄｉｎ的表达琏与ｏＢＲＢ的通透性呈反比十。ｏｃａｌｕｄｉｎ的多个博士学位

论文丝氩酸和苏氢酸位点可以被磷酸化，而ｏｃｃｌｕｄｉｎ被磷酸化后，造成ｏ

ｃｃｌｕｄｉｎ的含量下降，台成减少。缺氧被认为是造成ｏＢＲＢ损伤的重要原

因之一，包括糖尿病视嘲膜病ｆｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＤＲ）、

高血压视网膜病变（ｈｙｐｅａｅｎｓｉｖｅｒｅｔｉｎｏｐａｔｂｙ，Ｈｅ，Ｐ），

早产儿视网膜痛变（ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙｏｆｐｒｅｍａｔｕｒｉｔｙ，ＲＯ

Ｐ）蝴｜生年龄相关性黄斑病变（８９｝ｒｅｌａｔｅｄｍａｃｕｌａｒｄｅｇｅ

ｎｅｒａｔｉｏｎ，ＡＲＭＤ）ｑｊ，缺轼都在疾病的拄生发展中起到重要作１２

６，２７２８２９〕。机体组织在缺氧情况下，会引起缺氧诱导因子ｌ（ｈｙｐ

ｏｘｉａ＿ｉｎｄｕｃｉｂｌｃｆａｃｔｏｒ一１，ＨＩＦ－１）的升高，继而诱

发血管内皮生长网子（Ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈ

ｆａｃｔｏｒ．ＶＥＧＦ‟）表达的上调，而ＶＥＧＦ己在上述疾病中证明造成了ｉ

ＢＲＢ的破坏００ｍ，ｎ〕。目前的研究发现缺氧环境下ＲＰＥ细胞分泌的ＶＥＧ

Ｆ也明显增加””，那么ＶＥＧＦ升高是否是ｏＢＲＢ波破坏的原因，以发ＶＥＯＦ

通过怎样的途径来破坏ｏＢＲＢ成为了研究的热点。胞外信号调节激酶（ｅｘｔｒ

ａｌｃｅｌｌｕａｒｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄｋｉｎａｓｅ，ＥＲＫ）

是丝裂原活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅ—ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋ

ｉｎａｓｅ，ＭＡＰＫ）家族的重要成员，ＭＥＫＪＥＲＫ信号传导通路是调节细

胞生长，发育及分裂的信引咄磐的核心部分ｍ托”】。ＥＲＫ是一类丝／苏氨酸蛋白

激酶，于上世纪８０年代末被发现””。已知ＥＲＫ家族有５个亚族，及ＥＲＫＩ～

ＥＲＫ５，目前了解最多的是ＥＲＫｌ及ＥＫＲ２，多种刺激因子如ＶＥＧＦ，Ｔ

ＮＦ，ＰＥＤＦ等都可以激活ＥＲＫｌ／２来调节细胞的生理功能””。目前发现，

在多种疾病中都存在ＭＥＩＵＥＲＫ信号传导途径的过度激活。例如在口腔癌、乳

腺癌，肺癌等肿瘤疾病中，ＭＥＫ／ＥＲＫ接受丈量环境刺激驶细胞因子的信吼通

过级联反应逐渐放大，作用于多种核转录因子．促进癌细胞的增殖和转移，目前针

对抑制ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路来抑制肿瘤的发生发展已经成了肿瘤药物开发

的新方向，一些研究已表明这种方法由于毒副作用小而明显由于传统药物治疗〔２

０，２１〕。另外人们发现阻断ＭＥＫＹＥＲＫ信号传导通路可以抑制ＨＩＶ－Ｉ

病毒的复制，Ｉ旦为治疗艾滋病提供了新的方向口”。除此之外，Ｍ牛耍牛遥诵

藕糯纪吩诤彀呃谴凇保鲈嗟乃鹕怂囊约吧窬旧弁矗桑剑担钡燃膊〉姆

⑸⒄怪幸财鹆酥匾饔茫?人们正在通过深入研究其中的关联，希望找到治疗的新

方法。目前的研宄表明，ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路是ＶＥＧＦ调控的重婪信号

通路１”，但在ｏＢＲＢ的损伤损伤中ＭＥＫ／ＥＲＫ信号传导通路与ＶＥＧＦ的关

系还小甚明了，研究这一选径对阐明缺氧条件ＦＶＥＧＦ剥ｏＢＲＢ的.