elisa是什么意思sa在线翻译读音例句

・ １５２８ ・

・论 著・

国际检验医学杂志２０１５年６月第３６卷第ｎ期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｊｕｎｅ ２０１５，Ｖｏ１．３６，Ｎｏ．１１

ＥＬＩＳＡ与胶体金免疫层析法检测血清抗ＣＣＰ抗体在ＲＡ诊断中的比较

田卫花 。，马文媛 ，李莎莎

（１．甘肃省中医药研究院，甘肃兰州７３００５０；２．甘肃省中医院检验科，甘肃兰州７３００５０）

摘要：目的 比较胶体金免疫层析法和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测血清抗环瓜氨酸肽（ＣＣＰ）抗体结果差异性。

方法采用胶体金免疫层析法和ＥＬｌＳＡ法同步检测１１０例ＲＡ患者和１１０例健康体检者的抗ＣＣＰ抗体。结果 ２种方法经配

对Ｙ 检验，差异有统计学意义（ 。一１７４．３５４，Ｐ＜０．０１）；ＫａＰｐａ值评价（Ｋ一０．８９０，Ｐ＜０．０１）显示２种检测方法具有高度一致

性。ＥＬｌＳＡ法灵敏度和特异度分别为８３．６４ 和９２．７３ ，均优于胶体金免疫层析法。结论 ２种方法检测血清抗ＣＣＰ抗体存

在差异，ＥＬＩＳＡ法的灵敏度和特异度均较高，优于胶体金免疫层析法。

关键词：酶联免疫吸附试验； 抗环瓜氨酸肽抗体； 类风湿关节炎

ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４ｌ３Ｏ．２Ｏ１５．１１．０２０ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３—４１３０（２Ｏ１５）１１一ｌ５２８ ０２

Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ＥＬＩＳＡ ａｎｄ 齐安郡后池绝句 ｃｏｌｌｏｉｄａｌ ｇｏｌｄ ｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ

ｓｅｒｕｍ ａｎｔｉ－ＣＣＰ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ＲＡ

Ｔｉａｎ Ｗｅｉｈｕａ ～，Ｍａ Ｗｅｎｙｕａｎ。，Ｌｉ Ｓｈａｓｈａ

（１．ＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＧａｎｓｕ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｌａｎｚｈｏｕ，Ｇａｎｓｕ ７３００５０，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＣｌｉｎｉｃａｌ

Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｇａｎｓｕ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ ＴＣＭ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｌａｎｚｈｏｕ，Ｇａｎｓｕ ７３００５０，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｖａｌｕｅｓ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ—‘ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）ａｎｄ ｃｏｌｌｏｉｄａｌ ｇｏｌｄ ｉｍ——

ｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ａｓｓａｙ ｉｎ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ａｎｔｉ—ｃｙｃｌｉｃ ｃｉｔｒｕｌｌｉｎａｔｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅ（ａｎｔｉ—ＣＣＰ）ａｎｔｉｂｏｄｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｃｏｌｌｏｉｄａｌ ｇｏｌｄ ｉｍｍｕ—

ｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ａｓｓａｙ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｓｅｒｕｍ ａｎｔｉ ＣＣＰ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｎ １１０ ＲＡ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｎｄ １１０ ｈｅａｌｔｈｙ ｃａｓｅｓ．

Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｄａｔａ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｓｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｐａｉｒｅｄ Ｃｈｉ Ｓｑｕａｒｅ Ｔｅｓｔ（ 一１７４．３５４，Ｐ＜０．０１），ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ．Ｔｈｅ

Ｋａｐｐａ ｖａｌｕｅ ｗａｓ ０．８９０（Ｐ＜０．０１），ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｔｗｏ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗａｓ ｇｏｏｄ．Ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，

ｓｐｅｃｉａｌｉｔｙ ｏｆ ＥＬＩＳＡ ｗｅｒｅ ８３．６４ ａｎｄ ９２．７３ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｉｎ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ａｎｔｉ—ＣＣＰ Ａｎｔｉｂｏｄｙ，ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｄｉｆｅ—

ｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｃｏｌｌｏｉｄａｌ ｇｏｌｄ ｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ａｓｓａｙ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｉａｌｉｔｙ

ｏｆ ＥＬＩＳＡ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｃｏｌｌｏｉｄａｌ ｇｏｌｄ ｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ａｓｓａｙ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｅｎｚｙｍｅ—ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ； ａｎｔｉ ｃｙｃｌｉｃ ｃｉｔｒｕｌｌｉｎａｔｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ； ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ

类风湿关节炎（ＲＡ）是一种以关节损伤为主的慢性全身

性自身免疫疾病。ＲＡ患者致残率高，如不能够早期诊断、合

理治疗，３年内关节破坏可达９Ｏ．０Ｏ ，进而造成永久性的关节

畸形＿１］。最初本病诊断依据主要依靠１９８７年美国风湿病协会

（ＡＣＲ）的诊断分类标准，类风湿因子（ＲＦ）作为唯一的实验室

参考指标，其阳性是诊断ＲＡ标准之一，但ＲＦ在ＲＡ中特异性

较差，在临床中ＲＦ阴性的ＲＡ患者并不少见，常因ＲＦ阴性就

排除ＲＡ诊断，导致了误诊的发生。随着实验室研究手段和技

术的提高，国内外研究者证实抗环瓜氨酸肽（ＣＣＰ）抗体在ＲＡ

的诊断中有较高灵敏度和特异度 ］。抗ＣＣＰ抗体作为ＲＡ

早期诊断和预测疾病进展等方面显示出良好的前景 “］。

２０１０年美国风湿病学会（ＡＣＲ）和欧洲抗风湿联盟（ＥＵＬＡＲ）

一起宣布将抗ＣＣＰ抗体正式列入ＲＡ诊断标准之中 。然

而，现在临床实验室检测抗ＣＣＰ抗体的方法颇多，主要有酶联

免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法、胶体金免疫层析法、化学发光法、免

疫荧光分析法及电化学发光法等。但是化学发光法、免疫荧光

分析法及和电化学发光法试剂成本较高，且需要特殊仪器，因

此，国内很多临床实验室采用ＥＬＩＳＡ和胶体金免疫层析法检

测抗ＣＣＰ抗体。本研究收集ＲＡ患者和体检健康者的血清标

本检测血清抗ＣＣＰ抗体，拟在分析２种方法间的差异，评价２

种方法测定血清抗ＣＣＰ抗体在ＲＡ诊断中的临床应用价值，

现报道如下。

１资料与方法

１．１一般资料２０１２年１Ｏ月至２０１４年３月甘肃省中医院风

湿骨病科住院ＲＡ患者１１０例（ＲＡ组）和同期本院做健康体检

的健康人员ｌｌＯ例（非ＲＡ组），男８Ｏ例，女１４０例，年龄２５～

７Ｏ岁，平均（４８．９５．８）岁。ＲＡ患者其诊断符合美国风湿病

协会（ＡＣＲ）１９８７年修订的ＲＡ诊断标准，无严重肾功能损伤、

甲状腺、甲状旁腺等疾病。同时抽取ＲＡ患者和健康体检者晨

空腹静脉血３～５ ｍＬ，离心后血清标本储存于一７ｏ℃冰箱。

１．２仪器与试剂 抗ＣＣＰ抗体（ＥＬＩＳＡ法）试剂盒为欧洲诊

断试剂公司产品，抗ＣＣＰ抗体（胶体金免疫层析法）试剂盒为

上海科新生物技术股份有限公司产品，均提供质控血清。芬兰

雷勃ＭＫ２洗板机，雷杜ＲＴ一６１００酶标分析仪。

１．３方法

１．３．１ ＥＬＩＳＡ法 按试剂盒操作说明将患者血清进行１：５０

稀释，并按照操作说明依次加入Ａ＿Ｅ标准品、阴性、阳性对照、

稀释后的患者血清，均做２个复孔。浓度大于２５ Ｕ／ｍＬ定义

为阳性结果。

１．３．２胶体金免疫层析法按试剂盒操作说明将血清样本逐

滴滴人加样孔中，大约４滴，５～８ ｍｉｎ时判读试验结果。

１．４统计学处理采用ＳＰＳＳ１９．０统计软件进行数据处理与

统计分析，计数资料以例数表示，组间比较采用配对Ｙ。检验；

一致性检验采用Ｋａｐｐａ检验方法完成，当０．８１≤Ｋ≤１．００时，

＊ 基金项目：甘肃省卫生行业科研计划管理资助项目（ＧＷＧＩ ２０１３—１）。 作者简介：田卫花，女，主管检验师，主要从事自身抗体检测和肿瘤

免疫的研究。

国际检验医学杂志２文心雕龙名句 ０１５年６月第３６卷第１１期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｊｕｎｅ ２０１５，Ｖｏ１．３６，Ｎｏ．１１

证明两个产品测定结果具有高度一致性；当０．６１≤Ｋ＜０．８１

时，证明两个产品测定结果具有中度一致性；当０．４１≤Ｋ＜

０．６１时，证明两个产品测定结果间一致性较弱；当０．２１≤Ｋ＜

０．４１时，证明两个产品测定结果间一致性微弱；当０．００≤Ｋ＜

０．２１时，证明两个产品测定结果问一致性极差６ｊ。计算公式：

灵敏度一检测阳性例数／真阳性例数；特异度一检测阴性例数／

真阴性例数［７ ］。

２结 果

２．１ ２种检验方法检测结果的比较 胶体金免疫层析法和

ＥＬＩＳＡ法对２２０例标本检测结果的比较，差异有统计学意义

（Ｙ 一１７４．３５４，Ｐ＜０．０１），结果见表１。

表１ 胶体金免疫层析法和ＥＩ ＩＳＡ法对２２０例标本

的检测结果（ ）

２．２ ２种检验方法的检测结果与临床确诊数对比分析 检测

结果中临床确诊阳性（ＲＡ组）１１０例，胶体金免疫层析法检出

阳性８５例，２５例假阴性；ＥＬＩＳＡ法检出阳性９２例，１８例为假

阴性。健康体检者（非ＲＡ组）１１０例，胶体金免疫层析法阴性

例数９９例，１１例假阳性；ＥＬＩＳＡ法阴性例数１０２例，８例假阳

性，结果见表２。依据表２数据计算该２种检测方法的灵敏度

和特异度。ＥＩ ＩＳＡ法灵敏度达８３．６４ ，优于胶体金免疫层

析法灵敏度７７．２７ ；ＥＬＩＳＡ特异度为９２．７３ ，优于胶体金免

疫层析法特异度９Ｏ．０ｏ 。经Ｋａｐｐａ检验，２种检测方法具有

高度一致性（Ｋ一０．８９０，Ｐ＜０．０１）。

表２ 胶体金免疫层析法和ＥＬＩＳＡ法检测结果

与临床确诊数的情况（ ）

３讨 论

ＲＡ是一种以周围关节受损为主的慢性自身免疫病，是最

常见的炎性关节疾病之一。ＲＡ的特征表现为对称性、慢性、

进行性多关节炎并伴有全身多系统受累ｌｓ］。抗ＣＣＰ抗体阳性

与阴性患者在临床表现上有所不同。Ｆｏｒｓｌｉｎｄ等ｎ 研究发

现，抗ＣＣＰ抗体阳性者２年后关节更容易出现影像学改变。

Ｍｅｙｅｒ等 研究结果显示，１９１例抗ＣＣＰ抗体阳性的患者５

年后总Ｓｈａｒｐ评分增加的可能性明显高于单纯ＲＦ阳性患者。

Ｒ６ｎｎｅｌｉｄ等ｌ＿】２］研究表明，早期抗ＣＣＰ阳性ＲＡ患者，近几年内

发展为严重关亿万星辰不及你 心之所向 皆如所愿 节损伤的可能性要大大高于抗ＣＣＰ阴性患者。

因此，对于ＲＡ患者，检测其血清抗ＣＣＰ抗体具有重要的意义

与价值。

目前，随着对抗ＣＣＰ抗体ｌ临床应用价值的研究深入，市场

上已出现了Ｅ１ ＩＳＡ、胶体金免疫层析法、化学发光法、免疫荧

光分析法及电化学发光法等抗ＣＣＰ抗体检测试剂盒，其中化

学发光法和电化学发光法以快速、全自动化、特异度及稳定性

高等特点引起广泛关注，但是需要特殊的仪器，成本较高，不适

合基层医院开展。ＥＩ ＩＳＡ和胶体金免疫层析法操作简单，不

需特殊仪器设备，适合大多数实验室开展此检测项目。

本研究采用ＥＬＩＳＡ和胶体金免疫层析法２种方法测定

２２０例血清抗ＣＣＰ抗体结果并进行详细分析，评价２种方法间

的差异性及一致性，旨在探讨ＥＬＩＳＡ和胶体金免疫层析法在

ＲＡ患者中的应用价值。结果发现２种方法检测抗ＣＣＰ抗体

差异有统计学意义（Ｙ 一１７４．３５４，Ｐ＜０．０１）。

综上所述，ＥＩ ＩＳＡ法在多方面均优于胶体金免疫层析法。

这也可能由于ＥＬＩＳＡ法在开始检测前将患者血清以１：５０稀

释，从一定程度上避免了前带效应的发生，胶体金免疫层析法

直接用原倍患者血清检测，抗原抗体比例不适及前带效应更容

易出现，进而影响试验结果的准确性。但是ＥＬＩＳＡ法操作略

为繁琐，耗时也较长，相反胶体金免疫层析法更为快速、方便，

尤其适合基层或偏远地区医院。鉴于目前抗ＣＣＰ抗体比肩接踵 有多种

检测方法，且不同方法学问存在差异＿】 ，建议实验室根据自己

的实验条件选择试验方法，在发放检验结果时最好注明检测方

法。对于检验结果与临床症状不符的，建议采用灵敏度、特异

度更高的方法检测以明确诊断。

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ｃａｌ ｏｕｔｃｏｍｅ ｉｎ ｅａｒｌｙ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｒａｃｔｉｃｅ：ｒｏｌｅ

ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｔｏ ｃｉｔｒｕｌｌｉｎａｔｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅｓ（ａｎｔｉ—ＣＣＰ）［Ｊ］．Ａｎｎ Ｒｈｅｕｍ

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［１１］Ｍｅｙｅｒ Ｏ，Ｉ ａｂａｒｒｅ Ｃ，Ｄｏｕｇａｄｏｓ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉｃｉｔｒｕｌｌｉｎａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ／

ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ ａｓｓａｙｓ ｉｎ ｅａｒｌｙ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｆｏｒ ｐｒｅｄｉｃ—

ｔｉｎｇ ｆｉｖｅ ｙｅａｒ ｒａｄｉｏｇｒａｐｈｉｃ ｄａｍａｇｅ［Ｊ］．Ａｎｎ Ｒｈｅｕｍ Ｄｉｓ，２００３，６２

（２）：１２Ｏ一１２６．

［１２］ＲＯｎｎｅｌｉｄ Ｊ，Ｗｉｃｋ ＭＣ，Ｉ ａｍｐａ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃｉｔ—

ｒｕｌｌｉｎａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ／ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（ａｎｔｉ—ＣＰ）ｄｕｒｉｎｇ ５ ｙｅａｒ ｆｏｌ—

ｌｏｗ ｕｐ ｉｎ ｅａｒｌｙ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：ａｎｔｉ—ＣＰ ｓｔａｔｕｓ ｐｒｅｄｉｃｔｓ ｗｏｒｓｅ

ｄｉｓｅａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｇｒｅａｔｅｒ ｒａｄｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．Ａｎｎ

Ｒｈｅｕｍ Ｄｉｓ，２００５，６南园十三首其五古诗 ４（１）：１７４４—１７４９．

（收稿日期：２０１５－０西洲曲原文及翻译 ２—１８）